Инструкция определения группы крови цоликлонами

Регистрационные удостоверения

Определение групп крови цоликлонами осуществляется в реакции агглютинации. Цоликлоны представляют собой солевые растворы моноклональных антител для обнаружения антигенов эритроцитов человека. Каждый реагент строго специфичен соответствующему антигену. Моноклональные антиэритроцитарные антитела продуцируются гибридомами мыши или гетерогибридомами человек-мышь.

Методика проведения анализа

Алгоритм определения группы крови AB0 и резус-фактора цоликлонами облегчает и стандартизирует процедуру типирования. Позволяет однозначно интерпретировать результат реакции антиген/антитело. Для каждого исследования по системе AB0 достаточно одной серии реагентов. Объект исследования – цельная кровь, эритроцитарная масса, отмытые эритроциты, клетки крови в сыворотке или физрастворе.

цоликлоны производства Сангвитест

В качестве примера приводим схему проведения типирования крови человека по системе антигенов AB0.

Характерное отличие AB0 от других систем – постоянное наличие в сыворотке здоровых людей антител к антигенам, которые отсутствуют на эритроцитах. Естественные Анти-A и Анти-B антитела относятся к иммуноглобулинам класса M. Выработанные в результате иммунизации антигеном A и B иммунные антитела – иммуноглобулины класса G. Анти-A и Анти-B антитела в сыворотке большинства людей – это смесь иммуноглобулинов M и G.
  1. Обеспечьте яркое освещение помещения и температуру воздуха 15 – 25 °C.
  2. Промаркируйте лунки планшета: Анти-A, Анти-B, Анти-AB.
  3. Добавьте в подписанные лунки по одной капле (приблизительно 0,1 мл) реагентов Анти-A, Анти-B, Анти-AB.
  4. Поместите по одной маленькой капле концентрированной эритроцитосодержащей среды (0,01 – 0,03 мл) рядом с большой каплей каждого реагента.
  5. В каждой из трех лунок отдельной стерильной стеклянной палочкой смешайте моноклональный реагент с кровью.
  6. Плавно покачивайте планшет 2,5 – 3 минуты. Обычно агглютинация формируется в течение 5 – 10 секунд. Запас времени необходим для обнаружения слабых вариантов антигенов.
  7. Проведите визуальную оценку результатов реакции в каждой лунке. Результат реакции свидетельствует об обнаружении соответствующего агглютиногена.

Результаты реакции

Таблица результатов типирования крови с помощью цоликлонов.

Групповая принадлежность Моноклональный реагент
Анти-A Анти-B Анти-AB
0(I)
A(II) + +
B(III) + +
AB(IV) + + +

«+» — положительный результат реакции;
«-» — отсутствие агглютинации.

агглютинация эритроцитов

  • Отрицательный результат реакции во всех трех лунках свидетельствует об отсутствии агглютиногенов. Группа: 0(I).
  • Агглютинация с Анти-A и Анти-AB говорит о наличии агглютиногена A. Групповая принадлежность: A(II).
  • Реакция в лунках с Анти-B и Анти-AB указывает на наличие антигена B. Групповая принадлежность: B(III).
  • Реакция во всех трех лунках говорит о присутствии обоих антигенов. Группа: AB(IV).

результаты типирования с помощью цоликлонов

Методика проведения исследования с помощью цоликлонов требует обязательного подтверждения результатов реакции выявлением агглютининов α и β стандартными эритроцитами.

Алгоритм определения резус-фактора представлен в соответствующей статье.

Список литературы

  • Рагимов, А.А. Трансфузионная иммунология/А.А. Рагимов, Н.Г. Дашкова. — М.: Медицинское информационное агентство, 2004. — 279 с.
  • Шевченко, Ю.Л. Безопасное переливание крови/Ю.Л. Шевченко, Е.Б. Жибурт. — СПб.: Питер, 2000. — 308 с.
  • Минеева, Н.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии — СПб.: Издательско-полиграфический комплекс «Гангут», 2020. — 360 с.

Патенты

Содержание

  • Что такое цоликлоны?
  • Процедура определения группы крови
  • Расшифровка результатов
  • Определение резус-фактора
  • Полезные советы

Определение группы крови по цоликлонам — это простая процедура, которая проводится в лабораторных условиях. В ее основе лежит химическая реакция между моноклональными сыворотками и агглютиногенами. В результате можно узнать не только группу крови, но и ее резус-фактор, и эти методики считаются наиболее простыми, точными и доступными. Вещества продаются в удобных флаконах разного объема и оснащены дозатором-капельницей. Проведение анализа занимает несколько минут, благодаря чему в лабораториях можно в течение дня обработать огромное количество проб.

Что такое цоликлоны?

Цоликоны — это моноклональные антитела, которые находятся в солевом растворе. Вещество получило свое название в честь его изобретателей — Центральный Ордена Ленина Институт, сегодня переименованный в Гематологический научный центр. Они представлены жидкостью, которая продается во флаконах объемом 5 и 10 мл. Это универсальный реагент для гематологических исследований, поскольку позволяет определить группу крови как в системе АВ0, так в системе резус.

Выделяют 3 основные разновидности цоликлонов:

  • анти-А — жидкость красного цвета;
  • анти-В — синее вещество;
  • анти-D — прозрачный реагент для определения резус-фактора.

Для определения группы крови применяются цоликлоны анти-А и анти-В. Они вступают в биохимические реакции с агглютиногенами, которые расположены на поверхности эритроцитов — красных кровяных клеток. Эритроциты группы крови А содержат агглютиноген А, который прореагирует с цоликлоном анти-А. Аналогично определяется содержание агглютингена В. Положительным результатом реакции считается склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок.

СПРАВКА! Агглютинация — это склеивание веществ. Агглютиногенами называются соединения, которые находятся на поверхности эритроцитов и вызывают их склеивание при соединении несовместимых групп крови.

Процедура определения группы крови

Процедура, как определить группу крови с помощью цоликлонов, очень проста и проводится за несколько минут. Для нее потребуется нативная («живая») капиллярная кровь, допускается наличие в ней консерванта. Также понадобится планшет — плоская поверхность из стекла, на которой будет происходить реакция. Процедуру проводят по определенному алгоритму:

  1. нанести две большие капли цоликлонов на поверхность планшета (обычно реагент анти-А находится слева, а анти-В — справа);
  2. добавить небольшие капли крови, которые по объему будут в 10 раз меньше реагентов;
  3. аккуратно двигать планшет, чтобы кровь смешалась с раствором, но две капли не соединились друг с другом;
  4. через несколько минут наблюдать результаты.

Для установления группы подойдет и кровь с добавлением консерванта. Однако простота методики позволяет проводить ее на месте непосредственно после взятия биологического материала. Достаточно набрать небольшое количество капиллярной крови из пальца, чтобы ее полностью хватило для проведения анализа.

Цоликлоны
Анализ проводится на специальном стеклянном планшете

Расшифровка результатов

Спустя несколько минут после соединения реагентов можно наблюдать результаты. Полное смешивание жидкостей говорит об отсутствии реакции, а агглютинация проявляется появлением красных сгустков в прозрачном растворе. Это эритроциты, которые склеиваются между собой при контакте с несовместимыми моноклональными антителами. Далее можно расшифровать результаты по простому алгоритму:

  • 1 группа (0) — агглютинация отсутствует в обеих каплях, поскольку на эритроцитах отсутствуют агглютиногены;
  • 2 группа (А) — реакция наблюдается в первой капле с цоликлоном анти-А;
  • 3 группа (В) — во второй капле происходит склеивание эритроцитов при контакте с реагентом анти-В;
  • 4 группа (АВ) — появление красного осадка в обеих каплях.

Четвертая группа крови считается самой редкой, поэтому при появлении агглютинации в обеих лунках анализ проводится повторно. Кроме того, кровь необходимо добавить в обычный физиологический раствор, чтобы исключить вероятность опасных заболеваний. У здорового человека она никак не прореагирует с физраствором, а эритроциты не будут склеиваться.

Определение резус-фактора

Для определения резус-фактора понадобится цоликлон анти- D. Он представлен бесцветной жидкостью и также продается в небольших флаконах с дозатором. Чтобы провести реакцию, достаточно одной дополнительной капли крови, которую помещают на планшете отдельно. Процедура проводится по следующей схеме:

  1. нанести каплю цоликлона анти- D объемом 0,1 мл на стекло;
  2. рядом добавить каплю крови, объем которой составляет 0,01 мл;
  3. стеклянной палочкой соединить две жидкости и аккуратно шевелить стекло, чтобы кровь перемешивалась и реагентом;
  4. спустя 3 минуты зафиксировать результат.

Первые результаты могут просматриваться через 15 секунд, но для установления окончательного результата важно подождать 3 минуты. Наличие результата, то есть появление реакции агглютинации, говорит о том, что резус-фактор положительный, его отсутствие свидетельствует об отрицательном резусе.

СПРАВКА! Агглютинация выражается появлением красных хлопьев, состоящих из эритроцитов, которые можно увидеть невооруженным глазом, без специальных условий и оборудования.

Цоликлоны для группы крови
Расшифровка анализов происходит по таблице, положительным результатом считается агглютинация эритроцитов

Полезные советы

Определение группы и резус-фактора крови с использованием цоликлонов считается одним из самых простых и доступных методов, поэтому широко применяется в лабораториях разного уровня. Кроме того, такой анализ дает достоверные результаты. Однако в некоторых случаях они бывают ложными, а причиной этому становится несоблюдение нескольких правил. Простая инструкция по применению цоликлонов и работа с ними позволит избежать получения недостоверных результатов и необходимости проводить исследование заново:

  • хранить реагенты в холодильнике, при температуре от 2 до 8 градусов, а распечатанный флакон использовать в течение 30 суток;
  • исследования проводятся при комнатной температуре, а в слишком жарком помещении рекомендуется периодически охлаждать стеклянную поверхность планшета;
  • обозначать на планшете разные цоликлоны маркером, поскольку их цвет после добавления крови быстро исчезает;
  • соблюдать правильные пропорции реагентов: если крови будет слишком много, реакция агглютинации эритроцитов будет мало выражена;
  • не допускать смешивания капель жидкости, в которых уже присутствуют разные типы цолкиклонов — в таком случае реакцию придется проводить заново;
  • обозначать окончательный результат не менее, чем через 3 минуты после начала реакции.

Важно также соблюдать последовательность действий во время анализа. Так, если стеклянную поверхность не раскачивать, даже при отсутствии реакции склеивания эритроциты будут расположены в краевой зоне капли. Это может стать причиной неправильной интерпретации результатов. При определении группы крови необходимо учитывать острые и хронические заболевания, которые наблюдаются у пациента. При патологиях печени и органов кроветворной системы, а также болезнях, которые протекают по типу сепсиса, может происходить явление патагглютинации. Эритроциты будут склеиваться даже при контакте с обычным физиологическим раствором. Напротив, при лейкозе кровяные клетки не отреагируют на присутствие антител, и агглютинация не произойдет.

Цоликлоны — это важные реагенты, которые используются ежедневно в гематологических лабораториях. Они позволяют быстро и безошибочно определить группу крови и ее резус без дополнительного оборудования и специальных навыков. Однако важно выполнять простой алгоритм, чтобы результаты анализа действительно были достоверными.

Цоликлон – моноклональное антитело, образующееся путем генной инженерии. Чаще всего, для его получения используют мышей – животному вводят специальный антиген, а после получают асцитную жидкость грызуна, в которой и содержатся указанные антитела. Морфологически, они относятся к иммуноглобулинам класса М, т.е. антителам острой фазы. Механизм действия их обусловлен образованием комплекса антиген-антитело, где в качестве антигена выступают некоторые молекулы (в данной ситуации – белки, определяющие группу крови и ее резус), расположенные на мембране клетки.

Определение группы крови цоликлонами

Для чего проводится анализ?

Группа и резус-фактор – генетически обусловленные характеристики крови, которые наследуются от родителей и остаются неизменными на протяжении всей жизни человека. Классификация групп крови осуществляется, исходя из определенного набора биохимических параметров и состава антигенов, и насчитывает 4 основных группы. Переливание пациенту крови несовместимой группы или с другим резус-фактором несет с собой смертельную опасность – иммунная система начинает вырабатывать антитела против чужеродных клеток, которые атакуют и разрушают их. Именно по этой причине в ситуациях, которые несут с собой риск обширной кровопотери, необходимо точное определение принадлежности крови и резус-фактора как у донора, так и у реципиента.

Таблица групп крови и резус-факторов

Что такое цоликлоны?

Цоликлон — это солевой раствор моноклональных антигенам к антител эритроцитов человека. Моноклональные антитела для употребляют определения группы крови. Для их используют получения гибридомную технологию. Цоликлоны анти-А и созданы-В анти для определения групп крови системы человека АВО взамен стандартных изогем-сывороток агглютинирующих.

Цоликлоны

Цоликлоны анти-А и анти-В являются гибридомных продуктом клеточных линий, приобретенных в итоге мышиных слияния антителообразующих В-лимфоцитов с клеточками мышиной опухоль (миеломы костного мозга). Личные гибридомные продуцируют полосы гомогенные антитела только 1-го класса которые, иммуноглобулинов целиком схожи по структуре и био Антитела. активности, продуцируемые клеточками 1-го клона (потомство клеточки одной), являются моноклональными.

Группа крови и резус фактор – фото

В антителах клеток одной специфики, происходящих из 1-го образует, лимфоцита клеточки 1-го клона. Главное заключается в нужно: последующем получить от одной клеточки специальные наработать и антитела их в огромном количестве. Трудность заключается в задач 2-ух преодолении: во-1-х, обычные клеточки после нескольких гибнут делений; во-2-х, только раковые клеточки способны плодиться неограниченно. Для решения этих 2-ух несопоставимых 1975 в заморочек году Г. Кёлер и К. Мильштейн сделали модификации клеточные, либо гибридомы. Гибридомы — это обычных слияние лимфоцитов в питательной среде с клеточками Лимфоциты. миеломы в этой среде не гибнут, а от миеломного получают напарника возможность нескончаемо плодиться. Подобным гибридомный, образом клан плодится, а в итоге этого образуются процесса моноклональные антитела.

Определение групп крови по системе АВ0 при помощи цоликлонов Анти-А и Анти-В

Как проводится исследование?

Для определения группы крови с использованием цоликлонов необходима плоская ровная поверхность (планшетка), смоченная водой, набор химических реагентов и пробы биологической жидкости, причем специалист может использовать любую кровь: капиллярную, венозную, замороженную и т. д.

  1. Стороны планшета помечают, чтобы не перепутать, на какую из них будет нанесен тот или иной тип цоликлонов.

    Процедура определения группы крови цоликлонами

  2. На поверхность капают по одной капле реагентов (обычно цилоклоны анти-А и анти-В) и крови, причем объем химических веществ должен в 8-10 раз превышать объем биоматериала.
  3. Подождать 3-5 минут, аккуратно покачивая планшет, чтобы жидкости хорошо смешались, а эритроциты не оседали по краям образцов.

Спустя несколько минут наступит реакция, по которой можно с высокой точностью определить принадлежность крови к определенной группе.

Расшифровка результатов

Определение группы эритроцитарных антигенов и резус-фактора давно стало одним из обязательных исследований для большинства пациентов, поступающих на стационарное лечение. Его проведение возможно на любом уровне оказания медицинской помощи при условии наличия необходимых реагентов и инструментов.

Обычно, определение группы проводится с помощью стандартных сывороток, хотя, конкуренцию ему составляет еще один метод, сходный по методике проведения с эталонным использование цоликлонов.

Цоликлон моноклональное антитело, образующееся путем генной инженерии. Чаще всего, для его получения используют мышей животному вводят специальный антиген, а после получают асцитную жидкость грызуна, в которой и содержатся указанные антитела.

Морфологически, они относятся к иммуноглобулинам класса М, т.е. антителам острой фазы. Механизм действия их обусловлен образованием комплекса антиген-антитело, где в качестве антигена выступают некоторые молекулы (в данной ситуации белки, определяющие группу крови и ее резус), расположенные на мембране клетки.

Исследуемая кровь группы О(I)

Таблица. Реакции разных групп крови с цоликлоном анти-А и анти-В.

Группа крови Реакция с цоликлоном анти-А Реакция с цоликлоном анти-В
I группа Отсутствует Отсутствует
II группа Положительная Отсутствует
III группа Отсутствует Положительная
IV группа Положительная Положительная

Цоликлон Анти-B флакон-капельница

Что следует учитывать при проведении анализа?

Чтобы результат анализа был максимально достоверным, при проведении процедуры необходимо соблюдать ряд условий:

  • реагенты должны храниться в холодном месте при температуре +2-8 градусов во флаконах с плотно закрученной крышкой (в случае нарушения правил хранения они быстро теряют свои свойства);
  • для проведения анализа нельзя использовать цоликлоны с истекшим сроком хранения (он составляет около 30 дней) или жидкости, которые содержат осадок, хлопья или мусор;
  • исследование выполняется в хорошо освещенном помещении при температуре воздуха не ниже +15 и не выше +25 градусов, причем в нем не должно быть грязи, пыли и других факторов, способных исказить результат;

    Температура воздуха во премя процедуры должна соответствовать

  • при нанесении биоматериала и реагентов на поверхность планшетки следует точно соблюдать пропорции – если крови будет слишком много, реакцию сложнее отследить, а в противоположном случае (при малом объеме) она будет слишком медленной;
  • нельзя допускать, чтобы капли крови, смешанные с разными типами цоликлонов, сливались вместе – если это случилось, исследование проводят заново; по этой же причине для смешивания реагентов с биоматериалом следует использовать разные палочки.

Продолжительность реакции должна составлять не менее 3 минут, а при сомнительном результате время наблюдения за образцами биоматериала следует продлить до 5 минут. Однако по истечении 10 минут может произойти подсыхание биоматериала и естественное выпадение эритроцитов в осадок, поэтому доверять такому исследованию не стоит.

Для чего необходим анализ?

В настоящее время цоликлоны используются преимущественно для определения группы крови и резус-фактора. Исследование может проводиться как планово, по назначению участкового врача-терапевта, так и по экстренным показаниям, когда требуется переливание крови (в ходе операции произошла массивная кровопотеря или пациент был доставлен с обширной травмой и массивным кровотечением). В поликлинике определение группы проводится преимущественно за счет использования сывороток.

Что влияет на результаты процедуры

Группа крови по цоликлонам определяется чаще всего в стационаре или специализированных лабораториях. К использованию цоликлонов прибегают, обычно, при невозможности использования сывороток. Скорость получения результатов несколько быстрее, чем при исследовании стандартными сыворотками, что делает методику более универсальной. Многие лаборатории стремятся перейти на использование данного метода.

Видео — Определения групп крови с помощью цоликлонов

Содержание

  • 1 Зачем назначается анализ
  • 2 Что такое цоликлон
    • 2.1 Как проходит процедура
    • 2.2 Расшифровка результатов
    • 2.3 Как повысить точность исследования

Цоликлоны – это группа специализированных антител, получаемых путем генетической инженерии. Ранее для их производства применялись специальные линии лабораторных грызунов. В организм животных вводился особый антиген, затем получали асцитную (внутрибрюшную) жидкость грызуна и специальными методами очищали ее. Это позволяло получить указанные антитела. Самые современные методы позволяют получать аналогичные антитела в клеточных культурах, без задействования лабораторных животных.

С позиции иммунологии цоликлоны относятся к антителам, направленным на острые реакции, то есть иммуноглобулинам М. При помощи этих белков можно провести реакции, сопровождающиеся формированием комплекса антиген-антитело, причем в качестве антигена выступают специфические мембранные белки, определяющие группу крови, а также Rh-фактор, располагающиеся на поверхности клеток крови.

Определение группы крови цоликлонами

Зачем назначается анализ

Одними из важных, обусловленных наследственно характеристик организма каждого человека являются резус-фактор и группа крови. Они не изменяются на протяжении всего срока жизни. Конкретная группа зависит от наличия или отсутствия определенных антигенов на клеточной мембране, а также биохимических параметров их жизнедеятельности.

Существует 4 распространенных группы, а Rh-фактор может присутствовать (+) или отсутствовать (-). Определение этих показателей особенно важно перед процедурой переливания крови. Ведь если человеку влить несовместимую кровь, это будет грозить смертельной опасностью. В результате иммунитет начнет интенсивно продуцировать антитела против перелитых эритроцитов. Поэтому важно определить антигенную совместимость перед проведением процедуры переливания.

Сейчас цоликлоны применяют в основном для точного определения группы и Rh-фактора пациента. Тестирование может осуществляться планово, по назначению специалиста, например, при поступлении в стационар, или экстренно, перед проведением гемотрансфузии.

В условиях поликлиник цоликлоны используют редко, обычно применяются сыворотки. Цоликлоны особенно полезны тогда, когда важна скорость проведения анализа или невозможно использовать обычные сыворотки.

Что такое цоликлон

Цоликлон является раствором моноклональных антигенов к специфическим мембранным белкам эритроцитов человека. Ранее для проведения исследований применялись агглютинирующие изоген-сыворотки. Применение цоликлонов позволяет повысить скорость, качество и точность анализа на определение группы биоматериала по системе АВО.

Современные цоликлоны являются продуктом гибридных клеточных линий, полученных путем слияния антителопродуцирующих лимфоцитов с клетками миеломы мыши. Генерируемые ими иммуноглобулины практически полностью повторяют структуру естественных антител. Клеточные колонии от первого клона, продуцирующие эти соединения, относятся к моноклональным, так как являются потомством единственной клетки. Также этим термином называются продуцируемые ими иммуноглобулины.

Получение таких колоний длительное время было сложнейшей задачей, так как необходимо было совместить возможность клетки вырабатывать огромное количество антител и способность к неограниченному размножению. Впервые это удалось выполнить в 1975 году, когда было получено слияние лимфоцитов и опухолевых клеток, размещенных в одной питательной среде. Соединившись с опухолевыми клетками (способными делиться бесконечно), лимфоциты передали им способность генерации нужных антител. Такие гибридомные колонии могут активно размножаться и вырабатывать в процессе жизнедеятельности нужные моноклональные антитела.

Как проходит процедура

Для осуществления тестирования с применением цоликлонов потребуется специальная поверхность – планшет для определения группы крови, сами пробы в жидком виде и собственно раствор цоликлонов. Для реакции подходит биоматериал, взятый из любых сосудов – как капиллярный, так и венозный или артериальный.

Определение группы крови цоликлонами

Алгоритм действий выглядит так:

  1. Стороны планшета помечают, чтобы исключить ошибки с нанесением разных типов реагентов (во многих современных планшетах метки нанесены заранее).
  2. Капают в лунку по одной капле цоликлонов и биоматериала. Важно, чтобы объем реактивов был примерно в десять раз больше количества использованной крови.
  3. Ожидают 3–5 минут. В процессе ожидания осторожно покачивают планшет для обеспечения равномерного перемешивания жидкостей. Это предотвратит оседание эритроцитов по краям тестового образца, а также обеспечит лучшие условия для протекания реакции антиген-антитело.

Спустя три минуты можно провести оценку результатов или их отсутствия, что позволит с высокой надежностью определить групповую принадлежность биоматериала.

Расшифровка результатов

Исследование специфики антигенов эритроцитов и Rh-фактора является одной из рутинных процедур, которую проводят практически всем пациентам, проходящим лечение в условиях стационара. Анализ отличается простотой, процедура занимает не более 5 минут.

Таблица возможных сочетаний реакций антиген-антитело

Группа крови Реакция с цоликлоном анти-А Реакция с цоликлоном анти-В
I группа Отсутствует Отсутствует
II группа Положительная Отсутствует
III группа Отсутствует Положительная
IV группа Положительная Положительная

Позитивная реакция проявляется в виде «склеивания» эритроцитов и оседания сформировавшихся скоплений клеток. В случае отсутствия реакции кровь остается жидкой, и форменные элементы не выпадают в осадок.

Как повысить точность исследования

Для обеспечения правильного протекания реакции и достижения высокой точности результатов нужно придерживаться ряда рекомендаций:

  1. Цоликлоны требуется хранить в холодильнике, при температуре в диапазоне 2-8 °С. Крышка емкости должна плотно закрываться для предотвращения избыточного контакта с кислородом воздуха. Нарушение условий хранения может привести к потере антигенных свойств из-за разрушения сложных белковых молекул иммуноглобулинов.
  2. Для проведения исследования запрещено применять реагенты с истекшим сроком годности (обычно составляет не более 1 месяца). Также недопустимо применение жидкостей, в которых появился осадок, посторонние включения или загрязнения.
  3. Исследование нужно проводить в помещении, оборудованном качественным освещением, с температурой воздуха от 15 до 25 °С. Причем важна чистота, в воздухе не должны присутствовать пыль или другие загрязнения, способные привести к искажению результатов тестирования.
  4. Нанося биоматериал и реагенты на планшет для определения группы крови, следует строго придерживаться рекомендованных пропорций. Если биоматериала будет больше, чем требуется, реакцию станет сложно дифференцировать, а при недостаточном объеме биоматериала она будет идти слишком медленно.
  5. Недопустимо слияние капель крови, соединенных с различными цоликлонами. Если такая ситуация возникла, необходимо повторное проведение пробы. Также для смешивания реагентов с образцами биоматериала необходимо применять одноразовые палочки.

Важно учитывать, что реакция должна протекать около 3 минут. В сомнительных ситуациях возможно продолжение наблюдений перед оценкой результатов до 5–7 минут. Если с момента смешивания прошло более 10 минут, реакция считается недостоверной, так как за это время происходит подсыхание биоматериала и высока вероятность естественного выпадения форменных элементов крови в осадок. Достоверность такой пробы будет крайне низка.

Определение
группы крови с цоликлонами анти-А и
анти-Б

1Вступительное
слово:
Мы
проводим определение группы крови с
цоликлонами в процедурном кабинете по
назначению врача. На мне шапочка, очки,
маска, халат, фартук, перчатки. Руки
предварительно обработаны гигиеническим
способом.

2
Оснащение:

  1. Цоликлоны
    анти-А, анти-Б

  2. Исследуемая
    кровь (пробирка)

  3. Тарелка
    для определения группы крови.

  4. Стерильные стеклянные
    палочки 2 шт ( в стакане, чашке Петри)

  5. Изотонический
    раствор натрия хлорида

  6. Стерильная
    пипетка 1 шт.

  7. Стерильный
    капилляр с грушей.

  8. Ёмкость
    с 3% раствором хлорамина.

3
Техника манипуляции:

  1. Внести
    цоликлоны в отдельные лунки по одной
    большой капле.

  2. Внести
    капилляром маленькие (0,01 мл) капли крови
    рядом с каплями цоликлонов, избегая
    контакта капилляра и крови.

  3. Отдельными
    палочками смешать цоликлоны и кровь.

  4. Покачивать
    тарелку, наблюдать агглютинацию 2,5
    минуты.

  5. Внести
    пипеткой в лунки, в которых произошла
    агглютинация по 1й капле физиологического
    раствора

  6. Покачивать,
    наблюдать агглютинацию.

  7. Форма
    ответа:

При определении
группы крови с помощью цоликлонов …

  1. Агглютинация
    не наблюдается ни в одной из лунок –
    первая группа

  2. Агглютинация
    наблюдается с цоликлоном анти-А –
    вторая группа

  3. Агглютинация
    наблюдается с цоликлоном анти-Б –
    третья группа

  4. Агглютинация
    наблюдается с цоликлонами анти-А и
    анти-Б – четвертая группа

  1. После
    проведения манипуляции все использованные
    предметы замачиваются в емкости с
    трехпроцентным раствором хлорамина.

4
Возможные ошибки:

Грубые
ошибки:

  1. Не
    использование средств защиты медработника.

  2. Повторное
    использование палочек.

  3. Перенос
    палочек, контактировавших с кровью над
    лотком с чистыми палочками.

  4. Не
    соответствие картины агглютинации
    заключению о групповой принадлежности.

  5. Не
    продезинфицированы предметы,
    контактировавшие с кровью.

Не
грубые ошибки:

  1. Время
    ожидания агглютинации менее 2.5 мин.

  2. Не
    внесен физраствор в лунки, в которых
    произошла агглютинация.

  3. Удерживание
    палочек за концы, а не за центр.

5
Критерии оценивания:

Сдал
– отсутствие грубых ошибок, наличие не
более двух не грубых ошибок.

Не
сдал – наличие грубых ошибок, наличие
более двух не грубых ошибок.

При
совершении грубой ошибки преподаватель
может попросить повторить соответствующий
этап манипуляции. Если ошибка повторяется
– не сдал. Допускается не более одного
повторения.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]

  • #
  • #
  • #
  • #
  • #
  • #
  • #
  • #
  • #
  • #
  • #

Понравилась статья? Поделить с друзьями:
  • Инструкция опечаленным бродский анализ стихотворения
  • Инструкция оператора рубеж 2оп r3
  • Инструкция опель астра н скачать
  • Инструкция онн ответы на тест
  • Инструкция омепразола в капсулах по применению взрослым дозировка взрослым