Инструкция по забору транспортировке и хранению биологического материала

1. Инструкция по сбору, хранению и транспортировке

биологического
материала для лабораторных исследований

► Биологический материал должен находиться в маркированных пробирках (контейнерах) и сопровождаться заполненным индивидуальным направлением в одном экземпляре. ► Необходимо тщательно, разборчиво заполнить направление, указав следующие сведения: дату, № пробирки, наименование ЛПУ, направившего на исследование биоматериал, фамилию врача, забравшего материал; ФИО, возраст и пол пациента, предварительный диагноз; при беременности – срок беременности.

Правила
взятия, хранения и транспортировки
биоматериала

для
выявления возбудителей заболеваний
методом ПЦР

1.1. Общие рекомендации

1.1.1.
Взятие биоматериала производится из
предполагаемого места обитания
микроорганизмов и развития инфекции.

1.1.2.
Количество забранного материала должно
быть небольшим. Избыток отделяемого,
слизь и гной отрицательно влияют на
качество выделения ДНК и способствуют
деградации ДНК при хранении и
транспортировке.

1.1.3. При
внесении биоматериала, взятого у пациента
зондом с ватным тампоном или щеточкой,
в пробирку типа эппендорф с буферным раствором,
необходимо:

— соблюдать
стерильность;

— прежде,
чем погружать собранный на тампоне
(щеточке) биоматериал в раствор, размазать
его по сухой стенке пробирки, затем
смочить тампон (щеточку) в растворе и,
вращая зонд, тщательно смыть весь
материал со стенки пробирки и тампона
(щеточки);

— по
возможности отжать тампон о стенку
пробирки, удалить зонд с тампоном
(щеточкой) и закрыть пробирку.

1.2. Способы взятия биоматериала для исследований методом пцр

1.2.1. Соскобы. Для
соскобов используются одноразовые
стерильные зонды, имеющие ватный тампон
с повышенной адсорбцией или «щеточки»,
реже — ложки Фолькмана, малые ушные ложки
или аналогичные инструменты со слегка
затупленными краями. Поскабливающими
движениями собрать материал. Исследуемый
материал должен содержать возможно
большее количество эпителиальных клеток
и минимальное количество слизи, примесей
крови и экссудата. Внести материал в
стерильную пробирку типа эппендорф с
буферным раствором (см. раздел 1.1.).

Соскоб
из цервикального канала: перед
взятием соскоба необходимо удалить
избыток слизи стерильным ватным тампоном,
обработать шейку матки стерильным
физиологическим раствором. Зонд ввести
в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5
см, избегая соприкосновения со стенками
влагалища, и поскабливающим движением
(не до крови) собрать материал. Небольшое
количество эритроцитов в пробе не влияет
на результат анализа. При наличии эрозии
шейки матки материал берут с границы
здоровой и измененной ткани.

Соскоб
из уретры: зонд
ввести в уретру (у мужчин — на глубину
2-4 см) и несколькими вращательными
движениямисобрать
материал. Накануне перед взятием
материала допускается провокация
(острая пища, алкоголь и др.). Рекомендуется
воздержаться от мочеиспускания в течение
1-2-х часов перед взятием пробы. При
наличии обильных гнойных выделений
соскоб надо брать не позже, чем через
15 минут после мочеиспускания.

Соскоб
с конъюнктивы берут,
предварительно проведя анестезию глаза
0,5% раствором дикаина. Вывернув веко,
зондом с ватным тампоном (либо глазным
скальпелем) собрать эпителиальные
клетки с конъюнктивы.

Соскоб
из прямой кишки: зонд
ввести в анальное отверстие на глубину
3-4 см и вращательным движением собрать
материал.

1.2.2. Мазки. Одноразовым
стерильным зондом с ватным тампоном
или щеточкой взять небольшое количество
отделяемого (со сводов влагалища, из
зева, носоглотки и др.) и перенести в
стерильную пробирку типа эппендорф с
буферным раствором (см. раздел 1.1.).

1.2.3. Кровь. Для
исследований методом ПЦР кровь должна
быть нативной (не
свернувшейся).

Кровь
собрать асептически, путем венопункции
— в фирменную пробирку (2-3 мл) с
антикоагулянтом ЭДТА (гепарин
в качестве антикоагулянта использовать
нельзя!),
аккуратно перемешать, плавно переворачивая
пробирку.

Кровь
с ЭДТА является биоматериалом для
следующих групп исследований:

—
генетические исследования (момент
забора крови значения не имеет).

—
выявление возбудителей инфекций (наиболее
информативными являются пробы, взятые
при ознобе, повышенной температуре, т.
е. предположительно во время виремии
или бактериемии).

1.2.4. Моча. В
пустой стерильный контейнер с плотно
завинчивающейся крышкой собирают
утреннюю первую или среднюю порцию мочи
в количестве минимум 10 мл. Если забор
мочи проводят днем, то перед этим пациент
не должен мочиться 1,5-3 часа.

1.2.5. Мокрота. Утром
провести санацию ротовой полости и
горла (прополоскать раствором питьевой
соды). Собрать мокроту в пустой стерильный
широкогорлый флакон.

1.2.6. Биоптат. Взятие
материала осуществлять из зоны
предполагаемого местонахождения
возбудителя инфекции, из поврежденной
ткани или пограничного с повреждением
участка. Поместить биоптат в стерильную
пробирку типа эппендорф с буферным
раствором.

1.2.7. Слюна,
желудочный сок, ликвор, синовиальная
жидкость. Слюна
(1-5 мл), желудочный сок (1-5 мл), ликвор
(1-1,5 мл) — поместить в пустую стерильную
пробирку (контейнер).

1.2.8. Сок
предстательной железы. После
массажа предстательной железы сок
собирают в количестве 0,5-1 мл в пустую
стерильную пробирку (контейнер). При
невозможности получить сок, сразу после
массажа собирают первую порцию мочи в
количестве не более 10 мл (в этой порции
содержится сок предстательной железы).

1.2.9. Смывы,
бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ). Стерильным
ватным тампоном и 5-7 мл физиологического
раствора проводят смыв, например, с
наконечника эндоскопа или бронхоскопа,
и помещают 0,5-5 мл смыва в пустую стерильную
пробирку (контейнер).

1.2.10. Фекалии. Зонд
с ватным тампоном помещают внутрь
каловых масс и слегка проворачивают,
захватывая небольшое количество
материала. Затем материал помещают в
стерильную пробирку типа эппендорф с
буферным раствором.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]

• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #

Взятие биоматериала производят до применения курса антибактериальной терапии или не менее чем через 14 дней после ее завершения.

Пробы биоматериала необходимо собирать следующим образом:

— до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такой возможности — непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов;

— в количестве (вес, объем), необходимом для выполнения анализа, т.к. недостаточное для исследования количество биоматериала приводит к получению ложных результатов;

— с минимальным загрязнением материала нормальной микрофлорой, т.к. ее наличие приводит к ошибочной трактовке результатов, полученных, например, при исследовании мокроты, проб из носа, глотки (зева), гениталий и др.

Общие требования к доставке проб биоматериала в микробиологическую лабораторию

Все собранные пробы отправляют в микробиологическую лабораторию немедленно после получения, за исключением случаев использования емкостей с транспортными средами, разрешенными к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке.

Это необходимо для:

— сохранения жизнеспособности возбудителей и возможности выделения микроорганизмов, требующих особых условий культивирования (Haemophilus и др.);

— предотвращения избыточного роста быстрорастущих и активных микроорганизмов;

— поддержания соотношения исходных концентраций изолятов при наличии в пробе микробных ассоциаций;

— сокращения времени контакта пробы с некоторыми антисептиками, используемыми местно, которые могут обладать антибактериальной активностью;

— объективизации клинического диагноза инфекционно-воспалительного заболевания и оценки результатов терапии.

          При невозможности немедленной доставки патологического материала в бактериологическую лабораторию допускается хранение транспортных сред с образцами в термостате при температуре 37ºС в течение 18-24 часов.  

• Анализ крови

Для повышения точности исследования необходимо соблюдать рекомендации:

Кровь для исследования забирается строго натощак, до приема/введения лекарственных препаратов и до обследования (рентгеновское, эндоскопическое, ультразвуковое).

Не рекомендуется кушать 8 часов перед исследованием (не более 14 часов голода), воду разрешается пить в обычном режиме.

Накануне избегать пищевых перегрузок.

Рекомендуется заранее отменить препараты, существенно влияющие на результаты исследования (исключение — случаи контроля за лечением конкретным препаратом).

Кровь для исследования на вещества, концентрация которых в крови изменяется циклически, должна забираться в строгом соответствии с физиологическими циклами. Например, концентрация ФСГ и ЛГ определяется на 5−7 день менструального цикла.

Исключить прием алкогольных напитков накануне исследования.

Не курить в течение 1 часа до исследования.

Накануне исследования исключить физические и эмоциональные перегрузки.

• Общий анализ мочи

Для повышения точности исследования необходимо соблюдать рекомендации:

Накануне сдачи анализа не рекомендуется употреблять овощи и фрукты, продукты с красителями, которые могут изменить цвет мочи.

Не принимать мочегонные препараты перед исследованием.

Очень важна личная гигиена.

Женщинам во время менструации не рекомендуется сдавать анализ мочи.

Правильно соберите утреннюю мочу в контейнер. Для этого при первом мочеиспускании небольшое количество мочи (первые 1 — 2 сек) выпустите в унитаз, а затем, не прерывая мочеиспускания, в контейнер для сбора мочи необходимо собрать около 50−100 мл мочи.

Мочу доставить в лабораторию в течение 1−2 часов.

• Проба Нечипоренко

Для анализа мочи по методу Нечипоренко необходимо собрать утреннюю «среднюю» порцию (в середине мочеиспускания) в объеме 15−25 мл.

• Сбор суточной мочи

Перед сбором мочи необходимо провести гигиенический туалет наружных половых органов.

Правильно соберите мочу:

Первую утреннюю порцию мочи собирать не нужно, но отметьте время мочеиспускания. Затем соберите всю мочу, выделяемую в течение 24 часов от отмеченного времени первого мочеиспускания.

Удобнее сбор суточной мочи проводить в специализированный градуированный пластиковый контейнер объемом 2,7 л.

Мочиться нужно непосредственно в контейнер, после каждого мочеиспускания плотно завинчивая крышку. Во время сбора емкость с мочой следует хранить в холодильнике, не допуская замораживания.

Последнее мочеиспускание производится через сутки в то же время, которое отмечено, как время первого мочеиспускания. Суточный объем мочи в закрытом контейнере необходимо взболтать и отлить порцию (100 мл) в малый контейнер для исследования. Всю мочу приносить не надо!

В больнице необходимо сообщить суточное количество мочи.

• Сбор суточной мочи по Зимницкому

Для повышения точности исследования необходимо соблюдать рекомендации:

Не принимать мочегонные препараты во время проведения пробы (24 часа).
Приём всех лекарств в день проведения пробы нужно согласовать с врачом.
В день проведения пробы объём потребляемой жидкости должен составлять 1,5 — 2 литра.

Правильно соберите мочу:

Собирается моча за сутки (всего 8 порций в 8 контейнеров, каждые 3 часа).

! Обратите внимание, первая утренняя порция мочи не собирается. Последующие порции мочи (50 мл) в течение суток собираются в разные пронумерованные контейнеры каждые 3 часа. На каждом контейнере указывается время сбора.

Если в положенное для сбора мочи время ее нет (нет позыва к мочеиспусканию, пропустили ночной сбор мочи), то пронумерованная банка, соответствующая пропущенному времени, остаётся пустой.

• Анализ мочи на сахар

Для анализа мочи на сахар особой подготовки не требуется. Необходимо принести утреннюю порцию мочи.

• Анализ кала

Требования к сдаче биоматериала:

Перед исследованием кала не рекомендуется проводить рентгенологические исследования желудка и кишечника, колоноскопию, ставить клизмы (в течение 2- х дней перед анализом).

Накануне исследования не следует принимать слабительные, активированный уголь, препараты железа, меди, висмута.

Не использовать ректальные свечи на жировой основе.

Важна личная гигиена наружных половых органов и области заднего прохода.

Не следует допускать попадания в биоматериал мочи или воды.

Не рекомендуется проводить исследование кала у женщин во время менструации.

Собирать кал для исследования следует утром. Если возникают затруднения со сбором кала, то можно подготовить его заранее (не более чем за 8 часов перед сдачей кала в лабораторию). В таком случае пробу следует хранить в холодильнике, не замораживая.

Предварительно помочившись, кал собирают в сухую, чистую емкость. 3−5 см³ кала следует перенести в заранее подготовленный контейнер.

• Кал на скрытую кровь

Для сдачи анализа на скрытую кровь специальной подготовки не требуется.

Необходимо перенести пробу кала объемом 3−5 см³ в заранее подготовленный чистый сухой контейнер.

• Рекомендации женщинам по подготовке к сдаче мазка на ПЦР, РИФ, посева на флору, микоплазму, трихомонаду, грибковую инфекцию

Перед исследованием следует учесть рекомендации специалистов:

Не рекомендуется проводить исследование:
— в период приема антибактериальных препаратов
— в период менструации и в течение 1−2 дней после её окончания
— после проведения кольпоскопических проб

За 2−3 дня до исследования следует прекратить использование любых влагалищных таблеток, свеч.

Накануне не следует спринцеваться.

• Исследование мокроты

В контейнер собирают утреннюю порцию мокроты (перед завтраком).

Для качественного анализа требуется 3−5 мл исследуемого материала. Если откашливается скудное количество мокроты, то можно сделать раздражающие ингаляции (добавить в воду немного соды и соли) или накануне исследования следует принять отхаркивающие средства.