Уза 1 зарядное устройство инструкция по применению

Приветствую всех! Есть у меня современное зарядное устройство фирмы бош, работает хорошо, не жалуюсь. Но в гараже лежало старое зарядное устройство УЗА-1, по возрасту как я. Отец покупал ещё на заре своего первого автомобиля ЗАЗ-968М салатово-зеленого цвета. У зарядного уже заржавели стенки, поломался тумблер и внешний, а так же внутренний вид был печален. Восстанавливать начал из-за того, что попался мне комплект запчастей от другого УЗА-1, более внешне свежим. Поэтому решено было делать. Разобрал, провёл дефектацию, нарисовал схему, перепаял старые провода, поменял тумблер типа Т3, зачистил, покрасил, собрал и зарядное работает, оно и работало, но из-за тумблера и внутреннего монтажа (оторваный проводок), работало не верно. Проверил выдаваемые напряжения по таблице на задней крышке, чуть занижает от заданого до 0,5В, я думаю, это не критично. Теперь можно использовать, не только как зарядное, но как и источник питания на 6В, 12В постоянного тока, а так же 36В переменного тока с частотой 50Гц, можно подключить паяльник на 36В. Работы по восстановлению проводил вечерами, поэтому фото не так много и качество не очень хорошее, но я люблю работать руками и после того, как всё получается и всё работает возникает чувство удовлетворённости от проделанной работы. Процесса сборки нет, только уже готового результата, руки не доходили до фото. Забыл добавить, шунт перенёс на переднюю стенку, так как на боковом кронштейне мало места, близко к трансформатору.

Главная
> реплики телефонов > Зарядное устройство уза 1 инструкция

Все это Тюрберт выложил без всякой аффектации, тоном усталым и слегка сварливым. — Свалил! Утром поленился побриться — и пожалуйста…  — но когданибудь вы сочтете их.  — но когданибудь вы сочтете их. Я не помню ничего, кроме «отче наш». — Отчего же трудно? — Послушайте, Совримович!  — с вызовом выкрикнул черкес. Вы эгоист, поручик, и любовь ваша к отечеству тоже эгоистична: она мирится с тем порядком вещей, который удобен зарядное устройство уза 1 инструкция лично. Тюрберт сказал несколько слов, офицеры отсалютовали погибшим, солдаты бросили по горсти земли — и погребение было окончено.  — Отвиновский двинулся было из освещенного круга, но остановился. — Лжете, Тюрберт. Подпоручик уже отдышался, и веснушки вновь весело высыпали на щеках. — Это чужая кровь,  — задыхаясь, сказал офицер. Не в этом ли понимании заложено то, что мы зарядное устройство уза 1 инструкция чувством справедливости, господа? зарядное устройство уза 1 инструкция — Но я особо счастлив, что моим спасителем оказались именно вы, Олексин,  — улыбаясь, продолжал Тюрберт. Вы отвыкли служить отечеству, заменив отечество идеей. — Это что значит: кто быстрее застрелится, что ли? Да, великая история, есть чем гордиться, господа, есть, зарядное устройство уза 1 инструкция признать как воин, коему не чужды честь зарядное устройство уза 1 инструкция отвага. Вот уж вернемся в родное отечество — и прямотаки побежим к барьеру, если вы того желаете.  — с неудовольствием спросил Отвиновский.  — пожал плечами Отвиновский. Оставим банальности земским сердцеедам и предадимся самому безвинному из удовольствий: сну в обнимку с шинелью. — Все!  — Если такое же согласие царит среди всех офицеров в Сербии, то султан может отдать распоряжение о параде в Стамбуле. Гавриил изредка взглядывал на него, но видел почемуто не круглое, с кошачьими усиками лицо, а розовую, поросшую рыжим волосом, еще мокрую от зарядное устройство уза 1 инструкция грудь и мрачнел. Можете себе представить, как она будет счастлива.

Устройство зарядное автоматическое УЗА

Автоматическое зарядное устройство УЗА  обеспечивает 2-ступенчатый заряд стабилизированным током и напряжением (оснащен стабилизатором тока заряда, который осуществляет контроль над напряжением на аккумуляторе в процессе зарядки) аккумуляторов стартерного типа с переходом с 1-ой ступени на 2-ую в автоматическом режиме. Эти устройства позволяют поддержать аккумуляторные батареи стабильно в рабочем состоянии, компенсируя их самостоятельный разряд. Используется УЗА и для обеспечения электропитания различных устройств.

Зарядное устройство данного типа разработано для заряда двух аккумуляторов, относящихся типам 6СТ-55 – 6СТ-190. Подзарядка осуществляется в непрерывном режиме. Назначением данных приборов является также обеспечения электропитания цепей автоматики при подключенных аккумуляторах на объектах, где не проводится техобслуживание. 

Характерные особенности

Автоматическое зарядное устройство аккумуляторов УЗА – это надежное устройство, в котором обеспечена защита от короткого замыкания, переполюсовки ( неправильное подключение аккумулятора). По своему исполнению – это настенный аппарат, обслуживание которого осуществляется с одной стороны. Можно эксплуатировать аппарат и на горизонтальной поверхности (например, на столе), используя ножки, входящих в комплектацию.

Устройство оснащено клеммами пружинного типа с безвинтовым соединением, которые обеспечивают надежное стабильное давление на проводник, способствуя бесперебойному соединению. К преимуществам таких клеем относится и удобство во время монтажных и пуско-наладочных операций, также для них нет необходимости провести техобслуживание. 

Комплектация

Поставляется зарядное устройство УЗА в надежной упаковке, внутри которой находится само устройство, комплект установочных частей. Прилагается также комплект документации по эксплуатации. 

Уза 1 зарядное устройство как пользоваться

Устройство полностью автоматическое, защищено от перегрузок по входным и выходным цепям, работает в широком диапазоне входных напряжений, без изменения выходных параметров. Благодаря этому может использоваться в случаях, требующих длительного хранения аккумуляторов в состоянии постоянной готовности, с периодической автоматической подзарядкой, например в системах бесперебойного электропитания. Зарядные устройства выполнены в корпусе из ударопрочного пластика. Устройство нельзя использовать в помещениях, характеризующихся повышенной влажностью, токопроводящей пылью, а также пожароопасными и взрывоопасными условиями. Зарядное устройство полностью автоматизирует процесс заряда батареи и не требует контроля со стороны. Зарядное устройство реализует трех шаговую процедуру зарядки аккумуляторных батарей, позволяющую заряжать батарею максимально быстро и без повреждения.

Поиск данных по Вашему запросу:

Схемы, справочники, даташиты:

Прайс-листы, цены:

Обсуждения, статьи, мануалы:

Дождитесь окончания поиска во всех базах.

По завершению появится ссылка для доступа к найденным материалам.

Содержание:

• 5.3. Ускоренный комбинированный заряд
• Зарядное устройство УЗА 220/4.2-0.9 и АЗУ 4.2
• Инструкция Зарядные устройства Bosch С7 (рус)
• Как правильно зарядить аккумулятор автомобиля зарядным устройством
• Схема на зарядное устройство “Бархат”
• Устройство зарядное автоматическое УЗА-12/ Руководство пользователя

ПОСМОТРИТЕ ВИДЕО ПО ТЕМЕ: Как правильно заряжать аккумулятор

5.

3. Ускоренный комбинированный заряд

Снизить стоимость доставки к нам старого аккумулятора можно: 1. Указать его стоимость грн. Позволит избежать комиссии за страховку. Самому запаковать старый акб в оставшуюся упаковку от нового. Не платим за услуги упаковки Если пакует Новая почта – 15 – 50 грн Бывает они делают никому не нужный деревянный каркас – 70 грн. У Вас остались вопросы, напишите в ЧАТ или перезвоните нам: Если хотите оформить кредит, то обязательно ознакомьтесь со следующей информацией! Перед оформлением оплаты в Кредит – обязательно позвоните менеджеру – уточните наличие и цену, а также поставьте выбранный товар в резерв.

В сумму кредита входит только стоимость товара. Доставка, замена АКБ и другое, при необходимости, оплачивается отдельно, при получении товара. Получить кредит может только владелец карточки Приват Банка. Если ее нет в наличии, то в любой момент можете получить карту в ближайшем отделении банка.

Основные условия:. Например, взяв кредит на товар стоимостью грн, ежемесячный платеж составит грн. Ежемесячная переплата составит всего 29 грн. Обратите внимание, что для получения кредита на карточке должен быть достаточный кредитный лимит и сумма для первого ежемесячного платежа.

Узнать доступный лимит или увеличить его при необходимости предоставить подтверждение о владении автомобилем и др.

Устройство Bosch С7 предназначено для заряда и постоянного под заряда свинцовых аккумуляторов на 12 В и 24 В с жидким электролитом, AGM или глеевым электролитом. Эксплуатируйте устройство в хорошо проветриваемом помещении. Изготовитель не берет на себя ответственность за ущерб, причиненный в результате использования не по назначению. Устройство не предназначено для промышленного применения. Комплект поставки: 1. Зарядное устройство 2.

Сетевой кабель с сетевой вилкой 3. Соединительные клеммы 1 красная. Зарядный кабель с 2 глухими кабельными наконечниками 5. Руководство по эксплуатации 6. Крепление за крючок Описание компонентов 1. Крепежный крючок 3. Сетевой кабель с сетевой вилкой 4. Зарядный кабель с глухим кабельным наконечником красный и черный 5. Кнопка выбора режима 9. Защита от неправильной полярности Степень заряженности Индикатор полной зарядки горит Под заряд мигает Режим 1: 12 В заряд мото, авто Режим 2: 12 В заряд зимой, AGM Режим 3: 12 В блок питания Режим 4: 12 В регенерация Режим 5: 24 В заряд грузового авто Зарядное напряжение: Поврежденный сетевой кабель представляет опасность для жизни в результате поражения электрическим током.

Во время использования зарядного устройства аккумулятора не допускайте к нему детей и других лиц. Опасность травмирования! Защитите себя от высоковзрывчатой водородно-кислородной реакции! Гремучий газ это взрывчатая смесь газообразного водорода и кислорода.

При контакте с открытым огнем пламенем, жаром или искрами происходит так называемая водородно-кислородная реакция! Взрыво- и пожароопасность! Не используйте устройство для заряда сухих или не заряжаемых аккумуляторов. Обеспечьте, чтобы при использовании зарядного устройства не произошло возгорание взрывчатых или горючих материалов, например, бензина или растворителя! Зарядный кабель не должен иметь контакта с топливопроводном например, бензопроводом.

Во время заряда обеспечивать достаточную вентиляцию. Во время заряда установите снятый аккумулятор на хорошо проветриваемую поверхность.

Не используйте устройство для заряда и постоянного под заряда поврежденного или замерзшего аккумулятора! Перед подключением к электрической сети обеспечьте, чтобы подаваемый из сети ток согласно предписанию имел В , 50 Гц, заземленный нулевой провод, предохранитель на 16 А и автомат защитного отключения!

Не закрывайте зарядное устройство во время его работы! Защитите электро контактные поверхности аккумулятора от короткого замыкания! Опасность химических ожогов! Носите защитные перчатки! При попадании кислоты аккумулятора на кожу или в глаза немедленно промойте подверженные воздействию места большим количеством чистой проточной воды и немедленно обратитесь к врачу!

Опасность поражения электрическим током! Собранное ненадлежащим образом зарядное устройство может привести к опасности для жизни в результате поражения электрическим током.

Свойства изделия Данное устройство сконструировано для заряда открытых и множества закрытых свинцово-кислотных аккумуляторов, которые используются в легковых автомобилях, мотоциклах и некоторых других транспортных средствах – например, аккумуляторы WET с жидким электролитом , GEL с гелеобразным электролитом или AGM с абсорбирующим стекловолокном.

Зарядное устройство имеет в общей сложим 6 режимов заряда для различных аккумуляторов различных состояниях. Благодаря этому обеспечивается эффективный и надежный заряд. В отличии от обычных изделий, данное зарядное устройство имеет специальную функцию импульсный заряд которая позволяет зарядить почти разряженный аккумулятор.

После заряда зарядное устройство автоматически переключается в режим постоянного под заряда. Высоко ефективные защитные меры, предотвращающие неправильное использование и возникновение короткого замыкания обеспечивают безопасную работу. Благодаря интегрированной схеме зарядного устройство начинает заряд лишь через несколько секунд после выбора режима заряда. За счет этого предотвращаются искры часто возникающие во время подключения.

Кроме того управление зарядным устройством аккумулятора осуществляется с помощью внутреннего Микрокомпьютерного модуля MCU. Управление Перед вводом в эксплуатацию Перед подключением зарядного устройства необходимо ознакомится с руководством по эксплуатации. Кроме того, необходимо соблюдать предписания изготовителя автомобиля, касающиеся постоянно находящегося в автомобиле аккумулятора. Очистите полюса аккумулятора.

Следите за тем, чтобы Ваши глаза при этом не попала грязь. При заряде и постоянном под заряде из аккумулятора может выходить газообразный водород. Подключите черную соединительную клемму – 6 зарядного устройства к полюсу – аккумулятора. Соединительная клемма – черная 6 может быть подключена к кузову.

Только после этого подключите сетевой кабель к электрической сети. Как только зарядное устройство будет подключено к электрической сети, оно автоматически переключается в режим ожидания. Указание: Зарядное устройство имеет защиту от перепутывания полярности. Нажмите кнопку выбора режима 8 , чтобы выбрать режим 1. Загорается светодиодный индикатор Если Вы после этого не выполняете никакой операции, то через несколько секунд автоматически запускается процесс заряда и дополнительно загорается светодиодный индикатор После успешного заряда аккумулятора загорается светодиодный индикатор 11 и гаснет светодиодный индикатор Через короткое время устройство автоматически переключается в режим постоянного под заряда, светодиодный индикатор 11 мигает.

Нажмите кнопку выбора режима 8 , чтобы выбрать режим 2. С7 Можно использовать в этих автомобилях для того чтобы обеспечивать бортовую электронику напряжением во время замены аккумулятора. Подключить у установленному на автомобиле аккумулятора.

Нажмите кнопку выбора режима 8 , чтобы выбрать режим 3, светодиодный индикатор Г мигает. Указание: Поддерживающий режим. Указание: Поддержующий режим, как только будет прерван цепь тока, зарядное устройство автоматически переключается в режим ожидания. В этом режиме аккумулятор длительное время не заряжать.

Аккумулятор может выйти из строя. Блок питания Без подключения аккумулятора Удерживайте кнопку выбора режима 8 нажатой и примерно в течение трех секунд. Как только переключится интегрированный переключатель загорается светодиод поддержки Электропитание запускается с силой тока Указание: Предназначен в качестве блока питания для потребителей 12 В, например для переносного холодильника.

Указание: В этом режиме зарядное устройство имеет защиту от перегрузок макс.

Зарядное устройство УЗА 220/4.2-0.9 и АЗУ 4.2

В отличие от ближайших аналогов АЗУ— Н, ЗУ-1 устройство обеспечивает более бережный индивидуальный заряд АКБ, что увеличивает срок ее службы и не требует безотлучного дежурства аккумуляторщиков при зарядке. Кроме того, минимальное кипение АКБ в процессе заряда и возможность установки устройства на значительном расстоянии от АКБ позволяют повысить безопасность процесса зарядки АКБ. Устройство также позволяет оценить емкость АКБ с приемлемой точностью, не прибегая к циклам заряд-разряд. Устройство позволяет производить заряд батарей различных типов с конечным напряжением заряда до 16В и зарядным током до 20А. Устройство позволяет производить, при необходимости, зарядку отдельных банок батарей с открытыми перемычками, например, после ее ремонта.

Устройство зарядное автоматическое УЗ-А-6/,3-УХЛ для схема устройства зарядного автоматического “Электроника” – вариант 1 ( нумерация.

Инструкция Зарядные устройства Bosch С7 (рус)

Запросить склады. Перейти к новому. Принесли в ремонт. Решил поискать схему. Ничего по нему не нашел нигде. Ладно, обойдемся без схемы, впервой чтоль. Открыв, я был шокирован.

Как правильно зарядить аккумулятор автомобиля зарядным устройством

Выпрямители для заряда аккумуляторных батарей. Устройства зарядные автоматические серии УЗА предназначены для зарядки стабилизированным выпрямленным током тяговых аккумуляторных батарей электрифицированного безрельсового транспорта. Устройства предназначены для работы в закрытых помещениях в следующих условиях: Высота над уровнем моря до м. Окружающая среда не должна содержать химически активных газов и испарений. Рабочее положение вертикальное.

Зарядное устройство уза-1 инструкция – Регулятор тока заряда позволяет установить начальный ток восстановления, исходя из значения емкости аккумулятора.

Схема на зарядное устройство “Бархат”

Снижены цены на роликовые стеллажи для хранения аккумуляторов. Разработка новой установки для фильтрации электролита УФЭ Ускоренный комбинированный заряд производится в два этапа. На первом этапе заряд батарей осуществляется при постоянном зарядном напряжении, на втором этапе — при постоянной величине зарядного тока. Переход к заряду батарей при постоянной величине зарядного тока производится при снижении его на первом этапе заряда до величины, указанной в таблицах 9 и Для заряда батарей используется ремонтно-зарядная аккумуляторная станция СРЗ-А-М1 с автоматическим зарядным устройством УЗА и зарядно-разрядным устройством ЗРУ новой конструкции допускающим использование больших зарядных токов и позволяющим производить заряд батарей как при постоянной величине зарядного тока, так и при постоянном напряжении зарядного источника.

Устройство зарядное автоматическое УЗА-12/ Руководство пользователя

Рекомендации по заряжанию автомобильной батарее в гараже, на улице или домашних условиях с помощью ручного или автоматического зарядного устройства. В идеале методы комбинируются с помощью автоматического зарядного устройства. Тут всё гораздо проще. Нужно лишь установить напряжение в пределах 14,4—14,5 В и ждать. Минусовой вывод отключают перед зарядкой батареи, так как он подключен к бортовой сети и кузову автомобили.

Доставка от 1 дня! Оплата при Устройство зарядное автоматическое АЗУ- (УЗА/7, ХИТ Фото 1 импульсного зарядного устройства V.

Снизить стоимость доставки к нам старого аккумулятора можно: 1. Указать его стоимость грн. Позволит избежать комиссии за страховку.

Перед началом эксплуатации устройства УЗ-А необходимо изучить настоящее руководство, а также правила по уходу и эксплуатации аккумуляторной батареи. Устройство УЗ-А имеет плавную установку зарядного тока, электронную схему защиты, обеспечивающую сохранность аккумуляторной батареи при перегрузках, коротких замыканиях и неправильной полярности подключения выходных зажимов. При этом защита выполнена таким образом, что на выходе зарядный ток появляется только в случае, если к выходным зажимам подключен источник напряжения аккумуляторная батарея. Данное устройство производит заряд при наличии напряжения на аккумуляторной батарее не менее 4-х вольт. На заднюю стенку устройства зарядного вынесен радиатор для охлаждения выпрямителя.

Устройство полностью автоматическое, защищено от перегрузок по входным и выходным цепям, работает в широком диапазоне входных напряжений, без изменения выходных параметров.

Женщина любит ушами, сердцем. Писатели-детективщики романтизируют образы благородных негодяев, возводя силу в ранг высших добродетелей. Поддавшись любви к девушке, он теряет часть магической силы и предает своего любимца — дракона зарядное устройство уза 1 инструкция. Плотный зарядное устройство уза 1 инструкция прикрывал лицо сидящей. Табор еще достаточно хорошо держится, испытывая адский искус. И все же такого бурного расцвета, как в е годы XX века, в истории российской словесности детектив не переживал никогда. А сейчас словно открылись какие-то неведомые шлюзы, и грязь полилась изо всех щелей бурным и нескончаемым потоком.

Приветствую всех! Есть у меня современное зарядное устройство фирмы бош, работает хорошо, не жалуюсь. Но в гараже лежало старое зарядное устройство УЗА-1, по возрасту как я.

Гранты по формуле урбанизированных территорий — 5307

Уведомление о местоположении

Уведомление сайта

Министерство транспорта США Министерство транспорта США IconUnited States Department of Transportation

United States Department of Transportation

Что нового

Обзор программы

Программа финансирования «Формула урбанизированных территорий» (49USC 5307) предоставляет федеральные ресурсы урбанизированным районам и губернаторам для транзитного капитала и оперативной помощи в урбанизированных районах, а также для планирования, связанного с транспортом. Урбанизированная территория – это объединенная территория с населением 50 000 и более человек, которая определена как таковая Бюро переписи населения Министерства торговли США.

Распределения

• 2022 финансовый год: 6 920 874 612
• 2021 финансовый год: 5 375 259 282
• 2020 финансовый год: 5 371 536 821
• ФГ 2019: 5 262 516 268
• 2018 финансовый год: 5 137 177 613
• 2017 финансовый год: 5 010 807 790
• 2016 финансовый год: 4 911 077 833
• 2015 финансовый год: 4 823 914 787

Правомочные получатели

Финансирование предоставляется назначенным получателям, которые являются государственными органами, уполномоченными получать и распределять федеральные средства. Губернаторы, ответственные местные чиновники и государственные операторы транспортных услуг должны назначить получателя для подачи заявки, получения и распределения средств для городских районов в соответствии со статьей 49.USCA5307(а)(2). Губернатор или назначенное им лицо выступает в качестве назначенного получателя для урбанизированных районов от 50 000 до 200 000 человек.

Для урбанизированных районов с населением 200 000 человек и более средства распределяются и поступают непосредственно назначенному получателю, выбранному на местном уровне для подачи заявки и получения федеральных средств. Для урбанизированных районов с населением менее 200 000 человек средства распределяются между губернатором каждого штата.

Приемлемые виды деятельности

Приемлемые виды деятельности включают: планирование, разработку, проектирование и оценку транспортных проектов и другие технические исследования, связанные с транспортом; капитальные вложения в автобусы и деятельность, связанную с автобусами, такую ​​как замена, капитальный ремонт и восстановление автобусов, оборудование для предупреждения преступности и обеспечения безопасности, а также строительство объектов технического обслуживания и обслуживания пассажиров; и капитальные вложения в новые и существующие стационарные системы направляющих, включая подвижной состав, капитальный ремонт и восстановление транспортных средств, путей, сигналов, связи, а также компьютерного оборудования и программного обеспечения. Кроме того, соответствующие улучшения общественного транспорта и определенные расходы, связанные с программами управления мобильностью, покрываются программой. Все расходы на профилактическое обслуживание и некоторые дополнительные расходы на паратранзитные услуги в соответствии с Законом об американцах с ограниченными возможностями считаются капитальными затратами.

Для урбанизированных районов с населением менее 200 000 человек помощь в эксплуатации является приемлемым расходом. Урбанизированные районы с населением 200 000 и более человек не могут использовать средства для оперативной помощи, если FTA не идентифицирует их как соответствующие требованиям в соответствии со Специальным правилом.

Справочный номер

49 U.S.C. 5307

Доступность финансирования

Средства доступны в год выделения плюс пять лет.

Распределение финансирования

Финансирование распределяется на основе законодательных формул. Для площадей от 50 000 до 199 999 человек, формула основана на численности населения и плотности населения. Для районов с населением 200 000 человек и более формула основана на комбинации миль автобусных коммерческих транспортных средств, пассажирских автобусных миль, коммерческих транспортных миль с фиксированными направляющими и фиксированных маршрутных миль, а также населения и плотности населения.

См. формулу распределения 5307 за 2019 финансовый год.

Match

Доля федерального бюджета не должна превышать 80 процентов чистой стоимости проекта на капитальные затраты. Федеральная доля может быть 90 процентов на стоимость оборудования, связанного с транспортными средствами, в связи с соблюдением Закона об американцах-инвалидах и Закона о чистом воздухе. Доля федерального бюджета не может превышать 50 процентов чистой стоимости проекта по оказанию помощи в эксплуатации.

Тип гранта: Формула

[email protected]: Коллекция ДНК, тканей и клеточных линий как инструмент трансляции

• Список журналов
• Front Med (Лозанна)
• PMC6742711

Front Med (Лозанна). 2019; 6: 198.

Опубликовано онлайн 2019 г. ² , ¹ , ³ , ³ , ⁴ , ⁵ , ⁵ , ⁶ , ⁶ , ⁵ , ¹ and ^{1, *}

Author information Article notes Copyright и Информация о лицензии Отказ от ответственности

Заявление о доступности данных

[email protected] — интегрированный биобанк академической больницы, который собирает ткани аорты, кровь, клеточные линии (фибробласты, гладкомышечные клетки сосудов, мононуклеарные клетки периферической крови и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки). и ДНК пациентов с кардиогенетическими нарушениями как для диагностических, так и для исследовательских целей. Мы придерживаемся системы управления качеством и установили стандартные протоколы для отбора проб и обработки всех материалов, связанных с кардиогенетическими данными пациентов. [email protected] включен в инфраструктуру биобанков и исследований биомолекулярных ресурсов Бельгии (BBMRI.be), и образцы из этого биобанка доступны для коммерческих и академических исследователей в соответствии с установленной процедурой доступа. В настоящее время чрезвычайно ценная коллекция кардиогенетики состоит из более чем 8700 образцов ДНК, 380 образцов тканей и 500 клеточных линий 7578 пациентов и связана с обширными клиническими данными. Обсуждаются некоторые интересные потенциальные исследовательские приложения.

Ключевые слова: кардиогенетика, биобанк, внезапная остановка сердца, наследственная сердечная аритмия, аневризма аорты, кардиомиопатии

проф. Ван Лаер и Лоис. Эта исследовательская группа фокусируется на генетике аневризмы и расслоения грудной аорты (TAAD), наследственных сердечных аритмиях (Primary Electrical Disease, PED), кардиомиопатиях (CM) и наследственной гиперхолестеринемии (HC), а также молекулярных патофизиологических механизмах, лежащих в основе этих нарушений. За последние годы десятки генов были идентифицированы как молекулярная причина этих кардиогенетических заболеваний. Исследовательская лаборатория тесно связана с Отделом молекулярной диагностики CMG. В рамках научно-диагностического сотрудничества были разработаны и внедрены специфические молекулярные диагностические генные панели на основе секвенирования нового поколения (NGS) для TAAD, PED, CM и HC (1, 2). Параллельно профессор д-р Лоейс основал клинику кардиогенетики в сотрудничестве с отделением кардиологии университетской больницы Антверпена (UZA). Многопрофильная команда, включающая генетика, кардиологов, генетического консультанта, медсестру и психолога, ежегодно проводит более 750 консультаций кардиогенетических пациентов и членов их семей.

Целью банка [email protected] является систематический сбор, хранение и распространение различных типов образцов, полученных от кардиогенетических пациентов или членов их семей, для диагностических и/или исследовательских целей. Первоначальное диагностическое тестирование в основном включает генные панели TAAD, PED, CM и HC на основе NGS и / или секвенирование всего экзома (WES) для выявления причинных генетических вариантов. Это позволяет проводить последующее семейное тестирование и консультирование, индивидуальное ведение пациентов и потенциальную преимплантационную генетическую диагностику. Текущие исследовательские проекты в области кардиогенетики направлены на выявление новых генов и генетических модификаторов для TAAD, PED и CM, а также на анализ функциональных эффектов обнаруженных вариантов на молекулярном, клеточном и органном уровне с использованием клеточных и животных моделей, таких как мыши и рыбки данио.

Специфические расстройства, включенные в базу данных [email protected], включают синдром Бругада, синдром слабости синусового узла, синдром удлиненного и короткого интервала QT, аритмогенную кардиомиопатию правого желудочка, катехоламинергическую полиморфную желудочковую тахикардию, неишемическую дилатационную, гипертрофическую, некомпактную кардиомиопатию, синдром Марфана. , синдром Лоеса-Дитца, синдром семейной аневризмы/расслоения грудной аорты, аортопатия, ассоциированная с двустворчатым аортальным клапаном, сосудистый синдром Элерса-Данлоса.

[email protected] является частью более крупного биобанка UZA, который был основан при поддержке Фламандской инициативы по биобанкированию (CMI) и теперь включен в Бельгийскую сеть инфраструктуры биобанков и исследований биомолекулярных ресурсов (BBMRI.be). В рамках фламандской инициативы были определены различные тематические области, в том числе (ауто)иммунные заболевания, инфекционные заболевания, сердечно-сосудистые заболевания, метаболические заболевания и диабет, нейробиология, онкология, старение, репродуктивная медицина и редкие расстройства. В рамках темы сердечно-сосудистых заболеваний акцент на внезапную сердечную смерть (3) был определен и координировался UZA. Типы образцов включают стенку аорты и ткань аортального клапана, кровь, ДНК, РНК, кожные и сосудистые фибробласты, мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (iPSC). Все образцы собираются и обрабатываются стандартизированным способом в соответствии с протоколами «Стандартной операционной процедуры» (СОП), хранящимися в электронной лабораторной записной книжке (ELN) исследовательской группы (клиент E-Notebook 2014, версия 13.9)..0.0, PerkinElmer) или в системе управления документами DocBase (Acanthis) УЗА. Эти СОП и любые обновления проверяются старшим научным сотрудником и получают номер версии и дату для правильной ссылки. Все члены исследовательской группы (аспиранты, аспиранты и лаборанты) должным образом обучены следовать правильным СОП и правильно ссылаться на используемые протоколы в своих личных ELN.

Дизайн и цель биобанка [email protected] сопоставимы с другими международными биобанками, специализирующимися на сердечно-сосудистых заболеваниях, такими как биобанк Отдела биомедицинских исследований сердечно-сосудистых заболеваний в Royal Brompton & Harefield NHS Trust в Лондоне (https://www.hra.nhs. uk/planning-and-improving-research/application-summaries/research-summaries/cardiovascular-biomedical-research-unit-biobank/), базы данных GENCOR (4) и CONCOR (5) в Нидерландах. Хотя последний в основном ориентирован на структурные врожденные пороки сердца.

Этика — информированное согласие

Для всех исследовательских образцов, собранных для биобанка, информированное согласие, соответствующее правильному исследовательскому проекту, получено от пациентов, сохранено в папках в CMG или сохранено в электронном виде в электронной карте пациента UZA (EPD). . Каждый исследовательский проект был одобрен местным комитетом по исследовательской этике UZA, включая информационный лист и форму согласия для пациентов. Пациенты, которые посещают клинику кардиогенетики в диагностических целях, должным образом консультируются и информируются о возможном включении в исследовательские проекты в области кардиогенетики. Затем они могут предоставить устное или письменное согласие. Если они не согласны, образцы используются только в диагностических целях.

База данных

Все идентификационные, клинические и (генетические) диагностические данные пациентов собираются и хранятся в электронных картах пациентов в защищенной информационной базе данных больниц UZA (одобрение качества Объединенной международной комиссии (JCI), 2017 г. ). С этой целью каждый пациент получает уникальный идентификационный номер пациента UZA (ID UZA). Пациенты и родственники, принадлежащие к одной семье, получают уникальный семейный идентификатор, а родословная составляется с помощью специального программного обеспечения (PASS). Все соответствующие клинические и диагностические данные пациента с соответствующим идентификатором UZA и семейным идентификатором затем передаются в базу данных кардиогенетических исследований (Microsoft Access), которая хранится на защищенном сервере UA с автоматическим резервным копированием. Местонахождение образца, дата сбора или хранения и все данные исследования, включая данные генетической последовательности, данные функциональных экспериментов и результаты анализа, добавляются в эту базу данных. Только главный исследователь и врач профессор доктор Лоейс могут связать идентификаторы UZA с идентификационными данными пациента. Следовательно, для всех остальных членов исследовательской группы данные обезличены. Необходимые формы GDPR (Общее положение о защите данных) для различных элементов данных, собранных в базе данных кардиогенетических исследований, были заполнены и могут быть предоставлены Комиссии по конфиденциальности Бельгии по запросу в соответствии с рекомендацией 06/2017 от 14 июня 2017 г. эта комиссия. Все требования GDPR ЕС (2016/679) выполнены.

Сбор проб

Образцы крови берутся в UZA обученным персоналом больницы. Кровь собирают в пробирки с ЭДТА (5 мл) для выделения ДНК или сбора РВМС или в пробирки PAXgene (Qiagen) для выделения РНК. Образцы ткани стенки аорты и клапана берут в операционной УЗА и либо быстро замораживают и хранят при температуре -80°С в отделении патологии УЗА в течение 30 мин, либо переносят в ЦМГ в физиологическом растворе. Биопсии кожи забирают в дерматологическом отделении УЗА в стерильные пластиковые пробирки (Эппендорф) с физиологическим раствором. Эти образцы переносят в CMG при комнатной температуре в течение 24 часов после сбора, где они обрабатываются или хранятся при температуре -80 ° C сразу после прибытия.

Обработка проб

Экстракция ДНК из крови выполняется на автоматизированной системе выделения нуклеиновых кислот (Perkin Elmer) с роботизированной обработкой жидкости, ДНК хранится при температуре 4° или -20°C после измерения концентрации. Экстракцию РНК проводят с использованием набора RNeasy Mini (QIAGEN) или набора Quick-RNA MiniPrep (BaseClear) в соответствии с инструкциями производителя. РНК после измерения концентрации хранят в морозильной камере при температуре -80°. PBMC выделяют из крови с использованием стандартного протокола, основанного на среде для разделения лимфоцитов и этапах центрифугирования. Свежевыделенные РВМС затем криоконсервируют в жидком азоте в 10% растворе ДМСО (>3 миллиона клеток на криопробирку) до дальнейшего использования. Свежие образцы ткани стенки аорты или клапана или биоптаты кожи нарезают небольшими кусочками и расщепляют трипсином и коллагеназой с последующим культивированием в стандартной среде для фибробластов (среда RPMI, Gibco) для получения сосудистых, клапанных и дермальных фибробластов соответственно. После культивирования и размножения эти фибробласты криоконсервируют в жидком азоте в 10% растворе ДМСО (>2 миллиона клеток на криопробирку) до дальнейшего использования. Образцы свежей ткани аорты также целиком замораживают при температуре -80°C. Для отдельных пациентов линии гладкомышечных клеток сосудов (VSMC) получают из свежей ткани стенки аорты перед криоконсервацией.

Поколение иПСК

И МНПК, и дермальные фибробласты используются для создания ИПСК, специфичных для пациента. Размороженные PBMC культивируют в среде StemSpan (STEMCELL Technologies) в течение 9 дней, чтобы способствовать размножению гемопоэтических клеток. Размороженные фибробласты культивируют в обычной среде для фибробластов, пока они не достигнут 90% слияния. Затем для создания ИПСК в соответствии с инструкциями производителя используют набор для перепрограммирования Cytotune-iPS 2.0 Sendai (ThermoFisher Scientific), содержащий четыре фактора транскрипции Yamanaka в неинтегрирующих вирусных векторах Sendai. После появления колоний ИПСК проводят пять раундов ручного сбора, а затем пять раундов ферментативного пассирования и размножения. По крайней мере 12 различных клонов отбирают для криоконсервации на основании морфологических и ростовых характеристик и замораживают в жидком азоте в 10% растворе ДМСО. Три из этих клонов затем полностью подтверждены иммуноцитохимическим окрашиванием на маркеры плюрипотентности (Oct4, Nanog, Tra-1-60 и Tra-1-81) и доказательством их потенциала дифференцировки в три линии с использованием анализа образования эмбриоидных телец с последующим анализом qPCR для энтодермальные, мезодермальные и эктодермальные маркеры.

Меры обеспечения качества

Качество экстракции ДНК и РНК контролируется методами, основанными на спектрофотометрии (NanoDrop или Qubit — Thermo Fisher Scientific). Температура холодильников и морозильников постоянно контролируется, и система сигнализации будет активирована, если температура превысит определенный порог. Резервуары с жидким азотом также оборудованы системой сигнализации. Все клеточные культуры регулярно проверяются на предмет исключения микоплазменной инфекции и еще раз перед криоконсервацией. Устойчивость биобанка [email protected] гарантируется его размещением в университетской больнице Антверпена, а образцы хранятся не менее 30 лет.

Типов и номеров образцов

• Образцы ДНК: 8,700

• Образцы РНК: 246

• Образцы крови (неполцена

• Линии клеток фибробластов: 429 — всего 1860 криопробирок

• Линии ГМКС: 64 — всего 130 криопробирок0012

Эти образцы были взяты у 7578 пациентов.

Процедуры доступа

Как академическим, так и коммерческим исследователям может быть предоставлен доступ к нашей коллекции образцов в контексте конкретного сотрудничества. Они должны будут представить форму запроса материалов, в которой они описывают свой проект, включая дизайн исследования, запрошенные образцы, финансирование проекта и научную значимость. Положительная оценка этого запроса главным исследователем профессором доктором Лоейсом и местным исследовательским этическим комитетом UZA приведет к подписанию соглашения о передаче человеческого материала (MTA) и контракта, согласующего расходы на покрытие расходных материалов, необходимых для сбора, обращение с образцами и их хранение. Затем образцы и связанные с ними закодированные данные могут быть опубликованы, и в соответствии с условиями MTA исследователи обязаны давать отзывы о качестве образцов и результатах и ​​должны указывать Cardiogeneti[email protected] в любых научных сообщениях, связанных с их выводами.

Потенциал применения кардиогенетического биобанка чрезвычайно разнообразен, но некоторые примеры текущих применений обсуждаются ниже. Во-первых, большая коллекция образцов ДНК пациентов с четко определенным фенотипом может быть легко использована в качестве репликационной когорты для новых генов-кандидатов кардиогенетических нарушений. Для многих подгрупп кардиогенетических заболеваний, например, дилатационной кардиомиопатии, синдрома Бругада или аневризмы грудной аорты (6), диагностический набор мутаций далек от полного, и при открытии новых причинных генов проверка этих генов может быть получена путем повторного секвенирования ранее генетически обусловленных генов. нерастворенные образцы ДНК. Во-вторых, сбор специфических для региона образцов (например, Фландрия) дает возможность идентифицировать повторяющиеся мутации в одном и том же гене. Затем можно провести гаплотипирование, и идентичные гаплотипы указывают на мутации фламандских основателей. Это может инициировать более масштабные усилия по скринингу каскадных мутаций для выявления специфичных для региона в группе риска человек. В настоящее время мы идентифицировали три новых мутации-основателя в нашем кардиогенетическом биобанке. В-третьих, идентификация мутаций-основателей устанавливает уникальную платформу для выполнения исследований модификаторов. После фенотипической характеристики всех доступных носителей мутации-основателя для определенного гена и состояния можно воспользоваться общим генетическим фоном для выявления различий между носителями мутаций на крайних концах фенотипического спектра: например, старые незатронутые (полностью бессимптомные) носители мутации. по сравнению с очень молодыми носителями мутаций с явно выраженными симптомами. В-четвертых, сбор тканей стенки аорты и клапана открывает возможности для изучения паттернов экспрессии как на уровне белка, так и на уровне мРНК. Наконец, культуры РВМС и фибробластов позволяют создавать линии ИПСК, которые можно дифференцировать в кардиомиоцитах или гладкомышечных клетках сосудов. Таким образом, эти «взрослые» типы клеток могут быть получены у пациентов с четко определенными кардиогенетическими нарушениями, у которых сбор нативных кардиомиоцитов или гладкомышечных клеток сосудов невозможен. Потенциал применения этих клеточных линий, полученных из иПСК, огромен, поскольку их можно использовать как для патомеханических исследований, так и для фармакологических исследований, где они служат платформой для тестирования новых лекарственных соединений.

В заключение, используя хорошо задокументированные стандартные операционные процедуры и контроль качества в сочетании с превосходными и подробными клиническими данными из расширенной сети, [email protected] предоставляет чрезвычайно ценную коллекцию образцов пациентов, которые используются как в диагностических, так и в исследовательских целях.

Наборы данных, созданные для этого исследования, доступны по запросу соответствующему автору.

MA, GvdB, LV и BL подготовили документ. IL, JM, DS, AV, JS, EV, IG, IR, SL, JH, SG, AD, ES, PJ и MH внесли изменения в документ. Все соавторы внесли свой вклад в создание и сбор образцов для биобанка [email protected].

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Финансирование. Это исследование выполнено при финансовой поддержке Университета Антверпена (GOA), Фонда научных исследований Фландрии (FWO, Бельгия, G.0356.17), Голландского фонда сердца (2013T093), BL и EV являются старшими клиническими исследователями Фонд научных исследований Фландрии и BL получил грант консолидатора от Европейского исследовательского совета (Genomia — ERC-COG-2017-771945). А.В. и Д.С. имеют постдокторскую стипендию от Фонда научных исследований Фландрии.

1. Proost D, Vandeweyer G, Meester JA, Salemink S, Kempers M, Ingram C, et al. Эффективная идентификация мутаций с использованием целевого секвенирования следующего поколения 14 генов аневризмы грудной аорты. Хум Мутат. (2015) 36:808–14. 10.1002/humu.22802 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

2. Proost D, Saenen J, Vandeweyer G, Rotthier A, Alaerts M, Van Craenenbroeck EM и др. Целевое секвенирование следующего поколения 51 гена участвует в первичном электрическом заболевании. J Мол Диагн. (2017) 19: 445–59. 10.1016/j.jmoldx.2017.01.010 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

3. Saenen JB, Van Craenenbroeck EM, Proost D, Marchau F, Van Laer L, Vrints CJ, et al. Генетика внезапной сердечная смерть у молодых. Клин Жене. (2015) 88:101–13. 10.1111/cge.12519 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

4. Hermans JF, Christiaans I, van Tintelen JP, Wilde AA, Pinto YM. GENCOR: национальный реестр пациентов и семей, страдающих семейным пороком сердца в Нидерландах. Нет Харт Дж. (2006) 14: 272–6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

5.